Untersuchungen & Hinweise zur Probenahme

• Kultur auf aerobe / anaerobe Keime sowie auf Anforderung (längerfristige) Pilzkulturen auf selektiven Nährböden.

• Sekret mit Tupfer unter Vermeidung einer Berührung des Gehörganges aufnehmen. In Transportmedium geben.
• Gehörgang: sekretbedeckte Bereiche oder mit angefeuchtetem Tupfer trockene Läsionen abstreichen. Abstrich in Transportmedium geben.
• Bei Verdacht auf Otomykose Hautschuppen in sterilem Röhrchen einsenden.

• Kultur auf aerobe und anaerobe Keime, ggf. auf Pilze

• Nach Punktion der Nebenhöhlen aspiriertes Sekret in sterilem Röhrchen einsenden, möglichst rascher Transport ins Labor.

• Grampräparat, Kultur auf aerobe Keime, bei besonderen Fragestellungen auch auf anaerobe Keime. Auf Anforderung Legionellen, Pilze, Mycoplasmen.
• Bei V.a. Mykobakterien Spezialfärbung, TBC-Kultur, ggf. PCR

• Nach Wechseln von Trachealkanüle bzw. -tubus mit sterilem Katheter Sekret aspirieren und in steriles Röhrchen mit Schraubverschluss geben.

• Untersuchung wie Sputum
• Höhere Erregerausbeute bei Verdacht auf Tuberkulose

• Bronchoskopische Absaugung in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden.

• Grampräparat Keimzahlbestimmung Kultur auf aerobe, ggf. anaerobe Keime, auf Anforderung: Mykobakterien Hefen, Schimmelpilze Pneumocystis carinii, Tbc

• ca. 10 ml der bronchoskopisch gewonnenen Spülflüssigkeit in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden

• Grampräparat Kultur auf aerobe und anaerobe Keime
• Auf Anforderung Untersuchung auf Mykobakterien: Spezialfärbung, TBC-Kultur, ggf. PCR

• Probe unter sterilen Kautelen entnehmen.
• Möglichst 5 ml in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden.
• Zusätzlich können auch aerobe / anaerobe Blutkulturflaschen mit dem Material beimpft werden, ggf. bei Zimmertemperatur lagern.

• Kultur auf aerobe Keime

• Ca. 5 cm langes Segment in steriles Röhrchen ohne Transportmedium geben

Untersuchung auf Parasiten (z.B. Plasmodien, Mikrofilarien)

• Einsenden von EDTA-Blut
• alternativ Entnahme von Kapillarblut aus Fingerbeere oder Ohrläppchen
• möglichst im Fieberanstieg
• Anfertigen von Blutausstrichen durch das Labor

Blutausstriche

• Blutausstriche werden vom Labor angefertigt
• Procedere bei eigenem Anfertigen:
  
  • 3-5 Objektträger
  • je einen Tropfen Nativblut auf äußeres Drittel eines Objektträgers geben
  • Ausstreichen des Tropfens mit der schmalen Kante eines zweiten Objektträgers über den gesamten Träger
  • Trocknen an der Luft
  • Bruchsicheres Verpacken 

Dicker Tropfen

• Dicke Tropfen werden vom Labor angefertigt
• Procedere bei eigenem Anfertigen:
  
  • einen Tropfen Nativblut auf einen Objektträger geben
  • mit der Ecke eines zweiten Objektträgers oder einem Zahnstocher gut verrühren und sternförmig ausbreiten
  • Trocknen an der Luft
  • Präparat nicht zu dick anfertigen
  • Schriftprobe: durch das Präparat sollte untergelegte Schrift lesbar sein
  • Bruchsicheres Verpacken

Heparin-Blut

• Entnahme siehe Labormedizin
• Indikation: Nachweis von Mykobakterien
• EDTA-Blut und Blutkulturen sind für den Nachweis von Mykobakterien ungeeignet

• Grampräparat
• Kultur auf aerobe und anaerobe Keime
  
• ggf. Pilze
  
• Bebrütungsdauer unterschiedlich je nach klinischer Fragestellung: 7 Tage, bei V.a. Pilze 14 Tage, bei V.a. Endokarditis 21 Tage)

Blutkulturen

Eine Blutkultur besteht in der Regel aus einer aeroben und einer anaeroben Blutkulturflasche.

Entnahme und Beimpfung der Kulturflaschen

• Entnahme im Fieberanstieg oder früh nach Auftreten von Fieber und/oder Schüttelfrost
• unabhängig von Fieberhöhe
• vor Beginn der antimikrobiellen Therapie; bei bereits laufender Therapie am Ende des Dosierungsintervalls
• Entnahme weiterer Blutkulturen unter laufender antibiotischer Therapie, z. B. bei Nachweis von Staphylococcus aureus oder bei Candida-Sepsis
• beim Erwachsenen Punktion einer peripheren Vene (meist Vena cubitalis)
• bei Neugeborenen auch aus Kopfschwarten- oder Handrückenvenen
• Gefahr der Kontamination bei Blutentnahme über einen liegenden intravaskulären Katheter oder ein Portsystem;
  Indikation: Verdacht auf eine Katheter-assoziierte Infektion; in diesem Fall parallel periphere und zentrale Blutentnahme mit Angabe der Lokalisation auf Anforderungsbogen

Hände- und Hautdesinfektion

• hygienische Händedesinfektion
• Desinfektion der Punktionsstelle auf einer ausreichend großen Fläche (ca. 5 x 5 cm, bei Kindern entsprechend geringer) unter Berücksichtigung der Einwirkzeiten entsprechend den Herstellerangaben

Blutvolumen und Beimpfung der Kulturflasche

• Erwachsene: Entnahme von 20 ml Blut, gleichmäßige Verteilung (je 10 ml) auf aerobe und anaerobe Blutkulturflasche
• Kinder über 6 Jahren und Gewicht > 20 kg: Entnahme von 10 ml Blut und Verteilung auf aerobe und anaerobe Flasche mit je 5 ml
• Kleinkinder: Entnahme von 1-5 ml Blut
• Früh- und Neugeborenen: Entnahme von mindestens 0,5 ml Blut, besser 1-2 ml in spezielle Blutkulturflaschen ("PEDS-Flasche"); hier stehen keine speziellen Blutkulturflaschen für die Anaerobierdiagnostik bei Benutzung der automatischen Blutkultur-Detektionssysteme zur Verfügung.
• Entfernung des Deckels und Desinfektion des Gummistopfens vor Beimpfung der Kulturflasche
• Blutkulturflaschen sollen bei der Beimpfung Raumtemperatur haben.

 Anzahl der Blutkulturen

Bebrütungsdauer von Blutkulturen

• Bebrütungsdauer beträgt im Allgemeinen 7 Tage
• in Ausnahmefällen verlängerte Bebrütungsdauer
• erster Teilbefund mit "bislang steril" nach 48h Bebrütung
• erste telefonische Benachrichtigung nach Positivwerden der Flasche und Anfertigen eines Gram-Präparates

Spezielle Herstellerhinweise (Bactec-System der Fa. Becton Dickinson)

• Flaschen nicht belüften
• Lagerung nach Beimpfung bei Raumtemperatur
• Keine Lagerung im Kühlschrank oder Brutschrank
• rascher Transport auch am Wochenende
• Barcode nicht überkleben

• Spezialfärbung
  
• TBC-Kultur

• 5-10 ml Heparinblut

• ausreichende Desinfektion zur Verhinderung einer Kontamination mit physiologischer Flora
• kontaminationsfreie Materialgewinnung mittels
• perkutaner Punktion und Aspiration mit einer Spritze, Vermeidung einer transmukösen Punktion
• Inzision unter aseptischen Bedingungen und Gewinnung möglichst großer Materialmenge (5ml)
• Transport nativen Materials ohne Zusätze in verschlossener Entnahmespritze ohne Kanüle oder in sterilem Röhrchen
• nur bei Transportverzögerung Lagerung nativen Materials im Kühlschrank (4-8°C)
• Beimpfung einer Blutkulturflasche bei geringer Materialmenge oder Transportverzögerung, Lagerung bei Raumtemperatur!!
• kein Abstrich aus einer drainierten Abszesshöhle, da nur unzureichende diagnostische Ausbeute
• Transport von Glaskörper- und Vorderkammerpunktaten sowie Exprimaten aus dem Tränenkanal in sterilen Röhrchen oder im Eppendorfhütchen ohne spezielles Transportmedium

• Bronchial- und Trachealsekret sind hinsichtlich der diagnostischen Ausbeute anderen Materialien überlegen
• Gefahr der Kontamination durch Mund-/Rachenflora
• Transport nativ ohne Zusätze in sicher verschlossenen, verschraubten sterilen Transportgefäßen
• bei Verdacht auf Pneumonie zusätzlich Entnahme von Blutkulturen
• rascher Transport, ansonsten Lagerung im Kühlschrank (4°-8°C)

• Angabe der Menge der instillierten und der wiedergewonnenen Flüssigkeit zum Abschätzen des Verdünnungseffekts
• Gefahr der Kontamination mit der Flora des Mund-Rachenraumes, daher Absaugen von Sekretansammlungen im Mund-Rachenraum vor Einführen des Bronchoskops
• zum Nachweis von Pneumocystis jirovecii Materialgewinnung mit geschützter Bürste

Urethral-, Vaginal-, Zervix-, Douglasabstriche

• Gefahr der Kontamination mit Haut-, Schleimhaut- oder Stuhlflora
• besonderer Vermerk auf Anforderungsbogen bei
  • Schwangerschaft
  • Verdacht auf Sexualdelikt
  • Verdacht auf Gonokokken, eitriges Material in Gonokokken-Transportmedium
  • Verdacht auf Chlamydien, Epithelzellen gewinnen, molekularbiologischer Nachweis, trockener Tupfer ohne Medium, keine Resistenztestung möglich
  • Verdacht auf Mycoplasmen/Ureaplasmen, Mycoplasmenmedium
  • Kolpitis, Zervizitis, Endometritis, Anaerobiermedium
• Urethralabstrich:
  • Reinigung der Harnröhrenmündung
  • 2 cm tiefes Einführen eines sterilen Tupfers
  • Probenahme unter Drehen des Tupfers
• rascher Transport ins Labor, sonst Lagerung im Kühlschrank (4-8°C)
• Sonderfall: IUP
• Ziehen der Spirale
• steriler Transportbehälter ohne Zusätze
• gesonderter Vermerk bei V.a. Aktinomyceten auf Anforderungsbogen