Untersuchungen & Hinweise zur Probenahme

• Kultur auf aerobe / anaerobe Keime sowie auf Anforderung (längerfristige) Pilzkulturen auf selektiven Nährböden.

• Sekret mit Tupfer unter Vermeidung einer Berührung des Gehörganges aufnehmen. In Transportmedium geben.
• Gehörgang: sekretbedeckte Bereiche oder mit angefeuchtetem Tupfer trockene Läsionen abstreichen. Abstrich in Transportmedium geben.
• Bei Verdacht auf Otomykose Hautschuppen in sterilem Röhrchen einsenden.

• Kultur auf aerobe und anaerobe Keime, ggf. auf Pilze

• Nach Punktion der Nebenhöhlen aspiriertes Sekret in sterilem Röhrchen einsenden, möglichst rascher Transport ins Labor.

• Grampräparat, Kultur auf aerobe Keime, bei besonderen Fragestellungen auch auf anaerobe Keime. Auf Anforderung Legionellen, Pilze, Mycoplasmen.
• Bei V.a. Mykobakterien Spezialfärbung, TBC-Kultur, ggf. PCR

• Nach Wechseln von Trachealkanüle bzw. -tubus mit sterilem Katheter Sekret aspirieren und in steriles Röhrchen mit Schraubverschluss geben.

• Untersuchung wie Sputum
• Höhere Erregerausbeute bei Verdacht auf Tuberkulose

• Bronchoskopische Absaugung in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden.

• Grampräparat Keimzahlbestimmung Kultur auf aerobe, ggf. anaerobe Keime, auf Anforderung: Mykobakterien Hefen, Schimmelpilze Pneumocystis carinii, Tbc

• ca. 10 ml der bronchoskopisch gewonnenen Spülflüssigkeit in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden

• Grampräparat Kultur auf aerobe und anaerobe Keime
• Auf Anforderung Untersuchung auf Mykobakterien: Spezialfärbung, TBC-Kultur, ggf. PCR

• Probe unter sterilen Kautelen entnehmen.
• Möglichst 5 ml in sterilem Röhrchen mit Schraubverschluss einsenden.
• Zusätzlich können auch aerobe / anaerobe Blutkulturflaschen mit dem Material beimpft werden, ggf. bei Zimmertemperatur lagern.

• Kultur auf aerobe Keime

• Ca. 5 cm langes Segment in steriles Röhrchen ohne Transportmedium geben

Untersuchung auf Parasiten (z.B. Plasmodien, Mikrofilarien)

• Einsenden von EDTA-Blut
• Alternativ Entnahme von Kapillarblut aus Fingerbeere oder Ohrläppchen
• Nicht geeignet zum Nachweis von Mykobakterien
• Details zur Entnahme

Blutkulturen (konventionell)

• Einsenden von Blut in Kulturflaschen
  • Bei Erwachsenen 2-3 BK (jeweils aerobe und anaerobe BK-Flasche)
  • Bei Kleinkindern und Neugeborenen (PEDS-Flasche)
• Konventioneller Nachweise (Kultur) von anzüchtbaren Bakterien und Pilzen
• Nicht geeignet zum Nachweis von Mykobakterien
• Details zur Entnahme

Erregernachweis (NGS)

• Nachweis auch unter antiinfektiver Therapie möglich
• Mind. 10 ml Vollblut in 1-2x Streck-Röhrchen mit Stabilisationslösung
• Nachweis agnostischer, zellfreier Erreger-DNA (Bakterien, Parasiten, Pilze, DNA-Viren) mittels Next-Generation-Sequencing (NGS), DISQVER (Noscendo)
• Details zur Entnahme

Untersuchung auf Mykobakterien

• 5–10 ml Heparinblut (TBC-Kultur) (nur sinnvoll bei Patientinnen und Patienten mit zellulärem Immundefekt)
• 5–10 ml EDTA-Blut (TBC-PCR) (nur sinnvoll bei Patientinnen und Patienten mit zellulärem Immundefekt)

Untersuchung auf Parasiten (z.B. Plasmodien, Mikrofilarien)

• Einsenden von EDTA-Blut
• Alternativ Entnahme von Kapillarblut aus Fingerbeere oder Ohrläppchen
• Möglichst im Fieberanstieg
• Anfertigen von Blutausstrichen durch das Labor

Blutkultur (konventionell)

Eine Blutkultur besteht in der Regel aus einer aeroben und einer anaeroben Blutkulturflasche.

Entnahme und Transport

• Indikationsstellung unabhängig von Fieber
• Bei Patienten mit Fieber Entnahme im Fieberanstieg (wenn möglich)
• Entnahme wenn möglich vor Beginn der antimikrobiellen Therapie; bei bereits laufender Therapie am Ende des Dosierungsintervalls und/oder kultur-unabhängiges Verfahren (siehe Erregernachweis NGS)
• Entnahme weiterer Blutkulturen unter Therapie, u.a. bei Nachweis von Staphylococcus aureus oder bei Candida spp.
• Blutentnahme über liegenden intravaskulären Katheter oder Port bei Verdacht auf eine katheter-assoziierte Infektion; in diesem Fall parallel periphere und zentrale Blutentnahme gleichzeitig mit Angabe der Lokalisation auf Anforderungsbogen
• Flaschen nicht belüften
• Lagerung nach Beimpfung bei Raumtemperatur
• Keine Lagerung im Kühlschrank oder Brutschrank
• Barcode nicht überkleben

Blutvolumen und Beimpfung der Kulturflasche

• Erwachsene: Entnahme von 20 ml Blut, gleichmäßige Verteilung (je 10 ml) auf aerobe und anaerobe Blutkulturflasche
• Kinder über 6 Jahren und Gewicht > 20 kg: Entnahme von 10 ml Blut und Verteilung auf aerobe und anaerobe Flasche mit je 5 ml
• Kleinkinder: Entnahme von 1–5 ml Blut
• Früh- und Neugeborene: Entnahme von mindestens 0,5 ml Blut, besser 1–2 ml in spezielle Blutkulturflaschen (PEDS-Flasche)
• Entfernung des Deckels und Desinfektion des Gummistopfens vor Beimpfung der Kulturflasche
• Blutkulturflaschen sollen bei der Beimpfung Raumtemperatur haben.

Erregernachweis (NGS)

• Nachweis auch unter antiinfektiver Therapie möglich
• Mind. 10 ml Vollblut in 1–2x Streck-Röhrchen mit Stabilisationslösung
• Analog zur Blutkulturflasche beimpfen (Gummipfropfen desinfizieren und sichern)
• Nach Abnahme den Inhalt des Röhrchens durch mehrmaliges Wenden mischen.
• Befüllung der Röhrchen entweder als Einzelabnahme oder vor der Abnahme anderer Röhrchen insbesondere Heparinröhrchen (enthält störende Substanzen).
• Proben können bis zu 14 Tage bei Raumtemperatur gelagert werden.

• ausreichende Desinfektion zur Verhinderung einer Kontamination mit physiologischer Flora
• kontaminationsfreie Materialgewinnung mittels
• perkutaner Punktion und Aspiration mit einer Spritze, Vermeidung einer transmukösen Punktion
• Inzision unter aseptischen Bedingungen und Gewinnung möglichst großer Materialmenge (5ml)
• Transport nativen Materials ohne Zusätze in verschlossener Entnahmespritze ohne Kanüle oder in sterilem Röhrchen
• nur bei Transportverzögerung Lagerung nativen Materials im Kühlschrank (4-8°C)
• Beimpfung einer Blutkulturflasche bei geringer Materialmenge oder Transportverzögerung, Lagerung bei Raumtemperatur!!
• kein Abstrich aus einer drainierten Abszesshöhle, da nur unzureichende diagnostische Ausbeute
• Transport von Glaskörper- und Vorderkammerpunktaten sowie Exprimaten aus dem Tränenkanal in sterilen Röhrchen oder im Eppendorfhütchen ohne spezielles Transportmedium

• Bronchial- und Trachealsekret sind hinsichtlich der diagnostischen Ausbeute anderen Materialien überlegen
• Gefahr der Kontamination durch Mund-/Rachenflora
• Transport nativ ohne Zusätze in sicher verschlossenen, verschraubten sterilen Transportgefäßen
• bei Verdacht auf Pneumonie zusätzlich Entnahme von Blutkulturen
• rascher Transport, ansonsten Lagerung im Kühlschrank (4°-8°C)

• Angabe der Menge der instillierten und der wiedergewonnenen Flüssigkeit zum Abschätzen des Verdünnungseffekts
• Gefahr der Kontamination mit der Flora des Mund-Rachenraumes, daher Absaugen von Sekretansammlungen im Mund-Rachenraum vor Einführen des Bronchoskops
• zum Nachweis von Pneumocystis jirovecii Materialgewinnung mit geschützter Bürste

Urethral-, Vaginal-, Zervix-, Douglasabstriche

• Gefahr der Kontamination mit Haut-, Schleimhaut- oder Stuhlflora
• besonderer Vermerk auf Anforderungsbogen bei
  • Schwangerschaft
  • Verdacht auf Sexualdelikt
  • Verdacht auf Gonokokken, eitriges Material in Gonokokken-Transportmedium
  • Verdacht auf Chlamydien, Epithelzellen gewinnen, molekularbiologischer Nachweis, trockener Tupfer ohne Medium, keine Resistenztestung möglich
  • Verdacht auf Mycoplasmen/Ureaplasmen, Mycoplasmenmedium
  • Kolpitis, Zervizitis, Endometritis, Anaerobiermedium
• Urethralabstrich:
  • Reinigung der Harnröhrenmündung
  • 2 cm tiefes Einführen eines sterilen Tupfers
  • Probenahme unter Drehen des Tupfers
• rascher Transport ins Labor, sonst Lagerung im Kühlschrank (4-8°C)
• Sonderfall: IUP
• Ziehen der Spirale
• steriler Transportbehälter ohne Zusätze
• gesonderter Vermerk bei V.a. Aktinomyceten auf Anforderungsbogen